Realtime rt pcr là gì? Các công bố khoa học về Realtime rt pcr

Realtime RT-PCR là kỹ thuật sinh học phân tử quan trọng dùng để phát hiện và định lượng RNA qua quá trình phiên mã ngược thành DNA và khuếch đại DNA bằng PCR. Ứng dụng rộng rãi trong chẩn đoán bệnh truyền nhiễm, nghiên cứu biểu hiện gen và đo tải lượng virus. Quy trình gồm các bước: chiết xuất RNA, phiên mã ngược, khuếch đại PCR và phân tích dữ liệu. Lợi ích là kết quả nhanh, chính xác và độ nhạy cao, nhưng có chi phí cao và yêu cầu kỹ thuật viên tay nghề cao. Dù có hạn chế, Realtime RT-PCR vẫn là công cụ quan trọng trong nghiên cứu và y học.

Realtime RT-PCR: Khái Niệm và Nguyên Tắc Cơ Bản

Realtime RT-PCR, hay còn gọi là phản ứng chuỗi polymerase thời gian thực phiên mã ngược, là một kỹ thuật sinh học phân tử được sử dụng rộng rãi để phát hiện và định lượng RNA. Phương pháp này kết hợp giữa phiên mã ngược RNA thành DNA (cDNA) và khuếch đại DNA đích thông qua PCR, trong khi quá trình khuếch đại xảy ra, thông tin được ghi lại theo thời gian thực.

Ứng Dụng của Realtime RT-PCR

Kỹ thuật realtime RT-PCR được ứng dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực khác nhau của khoa học đời sống. Một số ứng dụng chính bao gồm:

  • Chẩn đoán bệnh truyền nhiễm: Được sử dụng để phát hiện các tác nhân gây bệnh như virus và vi khuẩn.
  • Nghiên cứu biểu hiện gen: Cho phép định lượng sự biểu hiện của gen trong các mẫu sinh học.
  • Đo lường nồng độ virus: Được sử dụng để định lượng tải lượng virus trong các nghiên cứu và điều trị bệnh.

Nguyên Lý Hoạt Động Của Realtime RT-PCR

Kỹ thuật realtime RT-PCR hoạt động dựa trên hai giai đoạn chính: phiên mã ngược RNA thành DNA, và khuếch đại DNA bằng PCR. Trong quá trình PCR, một đầu dò huỳnh quang hoặc thuốc nhuộm huỳnh quang đặc hiệu liên kết với DNA. Khi DNA được khuếch đại, tín hiệu huỳnh quang được phát ra và đo lường theo thời gian thực. Điều này cho phép ghi lại dữ liệu định lượng trong suốt quá trình thí nghiệm.

Các Bước Thực Hiện Realtime RT-PCR

Các bước chính trong một quy trình realtime RT-PCR bao gồm:

  1. Chiết xuất RNA: Từ mẫu sinh học, RNA được chiết xuất và tinh sạch.
  2. Phiên mã ngược: RNA được chuyển đổi thành cDNA sử dụng enzyme phiên mã ngược.
  3. Khuếch đại PCR thời gian thực: cDNA được sử dụng làm khuôn mẫu cho PCR, trong đó DNA được khuếch đại và tín hiệu huỳnh quang được đo theo thời gian thực.
  4. Phân tích dữ liệu: Sử dụng phần mềm để phân tích đồ thị khuếch đại và kết quả định lượng.

Lợi Ích và Hạn Chế Của Realtime RT-PCR

Lợi ích:

  • Cung cấp kết quả nhanh chóng và chính xác.
  • Khả năng định lượng RNA với độ nhạy cao.
  • Độ đặc hiệu cao nhờ sử dụng các đầu dò huỳnh quang.

Hạn chế:

  • Chi phí tương đối cao do cần thiết bị và hóa chất đặc biệt.
  • Yêu cầu kỹ thuật viên có tay nghề cao để thực hiện các thí nghiệm chính xác.
  • Dễ bị ảnh hưởng bởi các yếu tố ngoại cảnh như chất ức chế PCR.

Kết Luận

Realtime RT-PCR là một công cụ mạnh mẽ trong nghiên cứu sinh học phân tử và y học. Mặc dù có một số hạn chế, nhưng với những lợi ích vượt trội về độ chính xác và thời gian, nó vẫn đóng vai trò quan trọng trong những ứng dụng từ nghiên cứu khoa học đến chẩn đoán y tế.

Các bài báo, nghiên cứu, công bố khoa học về chủ đề realtime rt pcr:

PHÁT TRIỂN PHƯƠNG PHÁP RT-PCR ĐA MỒI ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS GÂY BỆNH DỊCH TẢ LỢN CHÂU PHI VÀ VIRUS GÂY BỆNH DỊCH TẢ LỢN CỔ ĐIỂN
Tạp chí Khoa học và Công nghệ Nông nghiệp - Tập 7 Số 1 - Trang 3396-3406 - 2023
Virus dịch tả lợn Châu Phi (ASFV) và virus dịch tả lợn cổ điển (CSFV) đã gây thiệt hại kinh tế rất lớn cho người chăn nuôi lợn. Có nhiều phương pháp xét nghiệm để phát hiện hai virus này như: PCR, Realtime PCR, phân lập virus, ELISA. Bên cạnh đó phương pháp Multiplex Real-time RT-PCR (mReal-time RT-PCR) để phát hiện đồng thời ASFV và CSFV cũng đã được đánh giá ở một số nước trên thế giới nhưng chư...... hiện toàn bộ
#mRealtime RT-PCR #sRealtime RT-PCR #ASFV #CSFV
Ứng dụng kỹ thuật realtime RT – PCR để định lượng FLT-1 mRNA nguồn gốc nhau thai trong huyết tương của thai phụ và khảo sát mối liên quan với tiền sản giật – sản giật
Tạp chí Phụ Sản - Tập 13 Số 4 - Trang 06 – 11 - 2016
Đặt vấn đề: Khảo sát mRNA nhau thai trong huyết tương thai phụ là một phương pháp không xâm nhập, có giá trị dự báo nguy cơ tiền sản giật – sản giật. Nghiên cứu này nhằm mục tiêu: (1) Bước đầu áp dụng kỹ thuật Realtime RT-PCR để định lượng FLT-1 mRNA có nguồn gốc nhau thai trong huyết tương của các phụ nữ mang thai; (2) Khảo sát mối liên quan giữa sự biểu hiện FLT-1 mRNA với tiền sản giật – sản g...... hiện toàn bộ
#Tiền sản giật #FLT-1 mRNA .
Ứng dụng kỹ thuật realtime RT - PCR để định lượng Serpine1 - MRNA nguồn gốc nhau thai trong huyết tương của thai phụ và khảo sát mối liên quan với tiền sản giật - sản giật
Tạp chí Phụ Sản - Tập 13 Số 3 - Trang 79-85 - 2015
Đặt vấn đề: Khảo sát mRNA nhau thai trong huyết tương thai phụ là một phương pháp không xâm nhập, có giá trị dự báo nguy cơ tiền sản giật – sản giật. Nghiên cứu này nhằm mục tiêu: (1) Bước đầu áp dụng kỹ thuật Realtime RT-PCR để định lượng mRNA của gene SERPINE1 trong huyết tương của các phụ nữ mang thai; (2) Khảo sát mối liên quan giữa sự biểu hiện gene SERPINE1 ở mức mRNA với tiền sản giật – sản...... hiện toàn bộ
#Tiền sản giật #SERPINE1 mRNA
XÁC NHẬN GIÁ TRỊ SỬ DỤNG XÉT NGHIỆM PHÁT HIỆN SARS-COV-2 BẰNG PHƯƠNG PHÁP REALTIME RT-PCR
Tạp chí Y học Việt Nam - Tập 521 Số 2 - 2022
‘Tiêu chuẩn vàng’ cho chẩn đoán xác định ca nhiễm SARS-CoV-2 là xét nghiệm phát hiện vật liệu di truyền của virus bằng kĩ thuật Realtime RT-PCR. Với các đặc tính kỹ thuật phức tạp, xét nghiệm Realtime RT-PCR cần được xác nhận và kiểm soát được chất lượng nghiêm ngặt. Mục tiêu: Kiểm tra xác nhận giá trị sử dụng bộ sinh phẩm Allplex™ SARS-CoV-2-Seegenee tại PXN Hóa sinh thuộc Bệnh viện hữu nghị Việt...... hiện toàn bộ
#SARS-CoV-2 #xác nhận phương pháp #Realtime RT-PCR #validation #verification #ASM.
Evaluation of the analytical performance of the new Abbott RealTime RT-PCRs for the quantitative detection of HCV and HIV-1 RNA
Journal of Clinical Virology - Tập 40 - Trang 99-104 - 2007
So sánh phương pháp xét nghiệm kháng nguyên nhanh SARS-CoV-2 với xét nghiệm RT-PCR thời gian thực ở những cá nhân có và không có triệu chứng Dịch bởi AI
BMC Infectious Diseases - Tập 23 - Trang 1-6 - 2023
Xác định các bệnh nhân dương tính với SARS-CoV-2 bằng các phương pháp xét nghiệm nhanh chóng và tiết kiệm chi phí là chìa khóa để cô lập những người bị nhiễm, làm gián đoạn chuỗi lây nhiễm và do đó, kiểm soát bệnh COVID-19. Trong bối cảnh này, xét nghiệm Kháng nguyên Nhanh (RAT) đóng vai trò quan trọng tại điểm chăm sóc nhưng độ nhạy thấp dẫn đến bỏ sót các trường hợp dương tính được báo cáo là mộ...... hiện toàn bộ
#xét nghiệm kháng nguyên nhanh #SARS-CoV-2 #RT-PCR #kiểm chứng #độ nhạy #độ đặc hiệu #dịch tễ học #COVID-19 #âm tính giả #sàng lọc hàng loạt
ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CHẨN ĐOÁN BA BỘ KIT REALTIME RT-PCR PHÁT HIỆN SARS-COV-2
Tạp chí Truyền nhiễm Việt Nam - Tập 2 Số 30 - Trang 40-44 - 2020
Mở đầu: Phương pháp realtime RT - PCR là kỹ thuật phát hiện SARS-CoV-2 đang được phát triển bởi nhiều phòng nghiên cứu và công ty sản xuất kit chẩn đoán. Các bộ sinh phẩm lựa chọn các vùng gen đích khác nhau cho độ nhạy chẩn đoán khác nhau. Mục tiêu: Nghiên cứu thực hiện với mục tiêu so sánh và đánh giá hiệu quả phát hiện SARS-CoV-2 bằng kỹ thuật realtime RT - PCR trên 3 bộ kit RealStar-SARS-CoV...... hiện toàn bộ
#COVID-19 #SARS-CoV-2 #realtime RT - PCR
Development and evaluation of novel one-step TaqMan realtime RT-PCR assays for the detection and direct genotyping of genogroup I and II noroviruses☆
Journal of Clinical Virology - Tập 50 - Trang 230-234 - 2011
Comparison of Zaire ebolavirus realtime RT-PCRs targeting the nucleoprotein gene
Journal of Virological Methods - Tập 284 - Trang 113941 - 2020
ĐÁNH GIÁ SỰ ĐỒNG NHẤT VỀ KẾT QUẢ REALTIME RT-PCR TRÊN HỆ THỐNG XÉT NGHIỆM COBAS 6800 SO VỚI QUY TRÌNH CỦA WHO TRONG CHẨN ĐOÁN XÁC ĐỊNH SARS-CoV-2
Tạp chí Truyền nhiễm Việt Nam - Tập 1 Số 45 - Trang 44-60 - 2024
Hiệu quả chẩn đoán trên lâm sàng của các phương pháp xét nghiệm PCR chẩn đoán SARS-CoV-2 đóng vai trò rất quan trọng trong công tác xác định ca bệnh, theo dõi điều trị cũng như dự báo quy mô diễn biến dịch. Chúng tôi thực hiện nghiên cứu này nhằm đánh giá sự đồng nhất về kết quả xét nghiệm Realtime RTPCR thực hiện trên hệ thống COBAS 6800 so với quy trình được Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) khuyến cá...... hiện toàn bộ
#COVID-19 #Cobas 6800 #SARS-CoV-2
Tổng số: 13   
  • 1
  • 2

Chủ đề khác

#h pylori

H pylori là gì? Các công bố khoa học về H pylori

#u buồng trứng

U buồng trứng là gì? Các công bố khoa học về U buồng trứng

#nano bạc

Nano bạc là gì? Các công bố khoa học về Nano bạc

#cyclophosphamid

Cyclophosphamid là gì? Các công bố khoa học về Cyclophosphamid

#cấu trúc electron

Cấu trúc electron là gì? Các công bố khoa học về Cấu trúc electron

#độc hoạt ký sinh thang

Độc hoạt ký sinh thang là gì? Các công bố khoa học về Độc hoạt ký sinh thang

#miền đích

Miền đích là gì? Các công bố khoa học về Miền đích

#vét hạch

Vét hạch là gì? Các công bố khoa học về Vét hạch

#bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu

Bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu là gì? Các công bố khoa học về Bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu

#mua sắm trực tuyến

Mua sắm trực tuyến là gì? Các công bố khoa học về Mua sắm trực tuyến


Xem thêm